相关的光和电子显微镜是什么?

相关的光和电子显微镜(CLEM)结合光的两个强大的技术和电镜生物样品提供补充信息跨宽尺寸政权。光学显微镜可以获得的信息对荧光标记的生活或固定的细胞。图像分辨率是有限的大约一半的波长的光照射样品;通常允许在250 nm大小限制特性得到解决。在光学显微镜可以超越衍射极限使用超分辨率技术,它可以解决功能低至50 nm。电子显微镜(EM)提供进一步提高分辨率与传统的光学显微镜技术相比,包括超分辨率技术。重要的是,他们可以解决物种在分子水平上,给予额外的信息在生物分子与光学显微镜相比。然而,EM技术,不能进行活细胞和样品必须准备修复细胞或生物系统分析之前使用EM获取合适的细胞特性的对比。

在生命科学CL188博金宝网页官网入口EM开始得到更加广泛的应用,最值得注意的是,改善神经科学和病毒学领域的理解,检查样品在多细胞分子大小的政权。使饥饿是一种有价值的技术在生命科学,因为它结合了结构细节的决议和荧光技术188博金宝网页官网入口显微镜的灵活的标签。

相关光和电子显微镜常见的缩写是什么?

通常结合光与电子显微镜技术是什么?

通常,CLEM依赖的电子显微镜部分透射电子显微镜(TEM)和扫描电镜(SEM)。然而,光学显微镜分析可以实现使用不同的光学显微镜技术。这导致大量可能的数量的互补组合光和电子显微镜技术,使CLEM领域的实验方法很难驾驭。请见下面的图表中,改编自Begemann却和冷冻²这提出了一个简单的图形说明组合的光和电子显微镜技术已经成功地实施。缩写的定义提供了在上面的表中。

CLEM关于样品制备的挑战是什么?

光和电子显微镜样品制备的方法依赖于特定的实验技术。光学显微镜依靠荧光标签的生物物种;有广泛的荧光团。相比之下,电子显微镜取决于是否使用TEM和SEM。TEM涉及样品脱水和分割成小片(使用超微切片机),而在扫描电镜样品分析之前涂有金属。

电子显微镜技术专注于一个较小的XY地区样本相比,使用光学显微镜和图像直接比较测量的地区使用不同的技术可能是一个挑战。结果,综合CLEM系统通常有两种变体,第一次与一个固定的视野光和电子显微镜测量和第二,查看区域成像技术之间切换时可以移动。通常,生物,或人工标记可以作为一个参考点来表示感兴趣的领域,并确保同一地区检查使用两种互补的技术。

本文的目的是介绍各种CLEM技术可用,技术评论链接在进一步阅读的参考资料部分。

引用

1. 2018年相关显微技术路线图,安藤et al .期刊。D::。phy。51岁,2018、443001、42页,https://doi.org/10.1088/1361-6463/aad055
2. 相关光电镜:连接突触结构和功能、Isabell Begemann却和冷冻米洛斯岛,前面。28岁的突触> 8https://doi.org/10.3389/fnsyn.2016.00028
3. 相关的超分辨率荧光和电子显微镜在真空中使用传统的荧光蛋白,克里斯托弗·J。Peddie, Marie-Charlotte Domart,种子直感Snetkov,彼得•奥图尔Banafshe Larijanid,迈克尔,苏珊·考和露西。结构生物学杂志》的歌,199,2,2017年,120 - 131,https://doi.org/10.1016/j.jsb.2017.05.013